کلونینگ ژن متالوتیونین در باکتری پسودوموناس به منظور افزایش میزان جذب کادمیم و جیوه در باکتری مهندسی شده

پایان نامه
  • وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه علوم و فنون دریایی خرمشهر - دانشکده علوم دریایی و اقیانوسی
  • نویسنده زهرا عظیمی
  • استاد راهنما حسین ذوالقرنین مهدی محمدی
  • تعداد صفحات: ۱۵ صفحه ی اول
  • سال انتشار 1390
چکیده

چکیده: در این مطالعه ابتدا جداسازی باکتری مقاوم به جیوه از پساب های منطقه صنعتی بندر امام خمینی (ره) صورت گرفت. پس از استخراج dna و pcr با استفاده از پرایمر های16s rrna ، ژنوم آن تکثیر شد و توالی16sریبوزومی این باکتری مشخص و باکتری مورد نظر شناسایی شد. باکتری محیطی مقاوم به دست آمده با 97 درصد مطابقت، متعلق به خانواده پسودوموناس بوده که نام علمی آن pseudomonas aeruginosa می باشد. ژن سنتتیک متالوتیونین سیانوباکتریsp. pcc 7942 synechococcusبا نام smta با استفاده از وکتور کلونینگpbluescript ks و همچنین وکتور بیان شوندهpet- 15b در باکتریe. coli k12 سویهdh5? و باکتری محیطی مقاوم به فلزات کادمیم و جیوه با استفاده از روش شوک حرارتی کلون گردید. کلونینگ ژن پس از برش آنزیمی با آنزیم های برشگر اختصاصی و همچنین pcr ژن متالوتیونین و روش تعیین توالی، در باکتری e.coli و سپس باکتری محیطی مورد تایید نهایی قرار گرفت. به منظور بررسی تغییرات میزان مقاومت باکتری ها نسبت به فلزات سنگین باکتری های ترانسفورم شده به همراه کنترل بر روی محیط کشت با غلظت های مختلف فلزات کادمیم و جیوه (450-50 (ppm کشت داده شد. مقاومت باکتری محیطی از ppm300-150 در مورد کادمیم و ppm 420-300 در مورد جیوه افزایش یافت. همچنین نتایج نشان داده اند که مقاومت باکتری e. coli نسبت به هیچکدام از فلزات افزایشی را نشان نداده است. به منظور بررسی میزان تجمع زیستی، باکتری های ترانسفورم شده به همراه کنترل در محیط کشت با غلظت اولیه 80 میکروگرم برمیلی لیتر جیوه و کادمیم کشت داده شدند و پس از هضم با اسید نیتریک 69% میزان تجمع فلزات در آن ها با استفاده از دستگاه جذب اتمی و vapor cold (برای جیوه) اندازه گیری شد. اما نتایج بررسی آماری داده های حاصل از اندازه گیری میزان تجمع فلزات کادمیم و جیوه تفاوت معنی دار در میزان تجمع فلز کادمیم در باکتری ترانسفورم شده محیطی را نشان داد در حالی که تفاوت معنی داری در میزان تجمع فلز جیوه در باکتری های ترانسفورم شده محیطی در مقایسه با سویه های شاهد مشاهده نشد. در مورد باکتری e. coliباکتری ترانسفورم شده تفاوت معنی داری در میزان تجمع فلزات کادمیم و جیوه را نسبت به شاهد نشان ندادند.

۱۵ صفحه ی اول

برای دانلود 15 صفحه اول باید عضویت طلایی داشته باشید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

اثر بربرین در تنظیم آستروسیتهای Gfap+ ناحیه هیپوکمپ موشهای صحرایی دیابتی شده با استرپتوزوتوسین

Background: Diabetes mellitus increases the risk of central nervous system (CNS) disorders such as stroke, seizures, dementia, and cognitive impairment. Berberine, a natural isoquinolne alkaloid, is reported to exhibit beneficial effect in various neurodegenerative and neuropsychiatric disorders. Moreover astrocytes are proving critical for normal CNS function, and alterations in their activity...

متن کامل

اثر بربرین در تنظیم آستروسیتهای Gfap+ ناحیه هیپوکمپ موشهای صحرایی دیابتی شده با استرپتوزوتوسین

Background: Diabetes mellitus increases the risk of central nervous system (CNS) disorders such as stroke, seizures, dementia, and cognitive impairment. Berberine, a natural isoquinolne alkaloid, is reported to exhibit beneficial effect in various neurodegenerative and neuropsychiatric disorders. Moreover astrocytes are proving critical for normal CNS function, and alterations in their activity...

متن کامل

همسانه سازی و بررسی بیان ژن متالوتیونین smtA در باکتری اشریشیا کلی به منظور جذب فلزات سنگین

یکی از راه های جذب فلزات سنگین علاوه بر روش های شیمیایی و فیزیکی، استفاده از فرآورده‌های زیستی می باشد. یکی از این فرآورده ها، پروتئین های جاذب فلزات سنگین مانند متالوتیونین می باشد.هدف: هدف از این مطالعه، همسانه‌سازی ژن متالوتیونین smtA از سیانوباکتری سینکوکوس ایلانگاتوس سویه PCC7942 ، بیان و بررسی جذب فلز توسط آن می‌باشد.روش‌ها: ژن smtA در ناقل همسانه‌سازیT/A ، همسانه‌سازی و در باکتری E.coli...

متن کامل

کلونینگ و بررسی بیان ژن کد کننده BMP-2 انسانی در باکتری E. coli به منظور تولید یک داروی نوترکیب

Introduction & Objective: Bone morphogenetic proteins are a group of cytokines that belongs to superfamily TGFβ. These proteins play an important role in evolution of many of organs and tissues through germinal period followed by amending and rebuilding of bone tissue and car-tilage. The aim of this study was to clone and expression analysis of BMP-2 gene in E. coli bacteria. Materials & Method...

متن کامل

بیان ژن متالوتیونین در باکتری اشریشیا کولی

سوال اساسی تحقق این بود که آیا می توان ژن متالوتیونین smta را در باکتری e. coli مورد بیان قرار داد. بدین منظور ژن متالوتیونین smta که مربوط به یک سیانوباکتری بود به کمک سنتز تسهیل شده ژن به روش واکنش زنجیره ای پلیمراز مورد ساخت قرار گرفت. سپس به درون وکتور کلونینگ ptz57r/t که از وکتورهای t/a-cloning محسوب می شود وارد گردید و بدین وسیله در سویه کلونینگ dh5? کلون گردید. در ادامه به وکتور بیانی pe...

15 صفحه اول

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه علوم و فنون دریایی خرمشهر - دانشکده علوم دریایی و اقیانوسی

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023